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SA3800光谱分析仪

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• 索尼SA3800光谱细胞分析仪采用先进的电子技术和专利光学技术，可提供出色的分析数据。其众多自动化功能提供真正的工作流程简

SA3800中的光谱技术通过采集波长为420 nm至800 nm的光子来优化灵敏度并增强暗信号检测。它还简化了有经验和新手用户的多色应用程序设计，工作流程和分析。

从仪器启动到质量控制，采集，分析和系统维护，所有操作都具有自动化功能。软件向导引导用户完成整个工作流程的过程，使系统适用于所有级别的流式细胞仪用户。

新颖的全局标准化只需单击即可自动将系统设置为主规范。这种功能可以最大限度地减少仪器每天和多台仪器的可变性，从而提高可靠性。

该系统具有易于使用的软件和自动化功能，可加快从设置到关闭的整个工作流程中的任务。自动对齐，实验设计器和光谱库只是简化操作的一些功能。每个系统都包含完全集成的FCS Express™软件，可提供最高的分析灵活性。

光谱技术，易于使用的软件以及整个工作流程的自动化使SA3800非常适合寻找功能强大且易于使用的细胞采集和分析分析仪的设施。

SA3800光谱分析仪亮点

• 使用光谱分析技术优化灵敏度，同时简化应用程序设计和工作流程。

• 独特的3D平板运动技术使平板（和样品）能够在水平和垂直方向上移动，从而消除了繁琐的流体及其相关的样品间交叉污染的需要。此外，内置的可调节混合机制有助于保持样品
  之间的样品异质性和最佳CV 。

• SA3800在整个工作流程中具有自动化功能，包括自动对齐和软件校准向导，可简化操作并提高结果的可靠性。

SA3800系统概述

SA3800光谱分析仪提高了灵敏度，简化了传统流式细胞仪的应用设计，工作流程和分析。这是通过光谱分析技术，整个系统的自动化，先进的电子设备和索尼系统独有的专利光学技术实现的。

光谱分析技术

光谱分析技术是SA3800系统的基础。光谱流式细胞仪通过收集整个可见光谱，简化工作流程并产生更好的数据。在传统系统中，使用颜色补偿减去重叠荧光，因此收集的光较少。相反，光谱流式细胞仪将荧光加在一起，然后使用分离来数学分离颜色。这种强大的功能还简化了工作流程，包括面板设计，并改善了自发荧光的可视化。

独特的棱镜收集系统可为32通道PMT提供发射光。这产生了34个用于荧光和明亮自发荧光的信号检测数据点，以实现荧光群体的准确可视化。研究人员可以看到每种荧光染料从420 nm到800 nm的完整光谱指纹。

光谱分离

光谱技术的强大功能是不混合。该技术允许研究人员将荧光团分离成纯信号，测量每个像素的每个荧光团的数量，以更准确地测量数据用于分析。

光谱分离可分离每个光谱指纹，实现荧光染料的完整和最佳可视化

光谱分离将每个光谱指纹分开，以更好地可视化每个荧光染料标记。与重叠信号丢失的传统滤波不同，光谱分离捕获从420nm到800nm发射的光子。这样做可以增强暗淡的信号检测，从而更好地显示稀有种群，荧光蛋白和多种激光激发的荧光染料。

这也让研究人员通过从信号中提取荧光团，并通过自发荧光分离荧光团的光谱，并创建独特的自发荧光参数。对于不受重叠信号（溢出）和自发荧光影响的每个颜色通道的清晰信号，光谱分析产生更好，无偏的数据用于分析。

光谱分析可减少误报，并提供比传统流式细胞仪更准确的分析。小鼠脾细胞用CD4 APC和抗IL-2 PE染色。A.在这个传统的密度图中，不清楚浅蓝色区域是暗淡的PE，弱的双重阳性还是非特异性的结合。B.使用光谱分析，将每个区域的光谱数据与光谱库的内容进行比较，以混合样品。这揭示了浅蓝色区域是高自发荧光。在Sony SP6800上收集的代表性数据。

系统自动化

整个工作流程都有自动化，以简化操作并确保准确的结果。该系统支持各种标准和深孔板，以及管式装载机中的12 x 75 mm 5 mL管。

新型3D自动进样器技术

新型3D AutoSampler使用固定探头并在水平和垂直方向上移动板，以最大限度地减少样品间的交叉污染并加快清洁速度。

探头上的传感器使系统能够准确地将样品移动到探头，计算管或板的高度，并在探头接触容器或底板表面时自动反冲探头。这种独特的设计旨在减少交叉污染和堵塞，并在遇到流动问题时允许自动恢复。它还可以加快样品之间的清洁速度。

板运动使用固定探针并在水平和垂直方向上移动板（和样品）。

SA3800支持标准高度和96孔和384孔板，除了96孔半深板和底板外，还具有圆形，扁平，V形和圆锥形。

混合自动化和冷却板

3D AutoSampler混合功能可确保在96孔或384孔样品板的采集过程中进行一致的采样。软件优化每种印版类型的设置。重要的是，混合功能可保持样品的完整性和不均匀性，确保所有颗粒均已正确悬浮，以获得一致的结果。

3D基底表面处的冷却板进一步降低了可变性并抑制了样品随时间的降解。

该图说明了如何使用系统的3D混合功能维持细胞异质性。没有混合，较大的细胞沉降形成异质样品，如下图所示。图表数据描述了如何在从1-96孔中获取3-μm和10-μm珠子的整个平板中保持样品完整性，以提供更完整，一致的结果。

该图描述了在80分钟的板获取期间冷却板对样品温度的影响。

软件

SA3800软件易于学习和使用。它指导研究人员从设置到面板设计，采集，分析和关闭。

用户首选项允许操作员和管理员指定一般仪器操作的选项以及如何设置实验。这些偏好促进了易用性并促进了无人值守的操作程序。

系统启动

在启动时，Align Check和Performance QC向导检查仪器校准，使用磁珠确保仪器以最佳状态运行。屏幕说明指导用户完成程序，然后显示进度和报告结果。性能报告显示MESF，Q和B值，以描述实时荧光检测性能。如果需要，可以在历史上下文中显示“对齐检查”和“性能QC”报告。

标准化

标准化模式将系统设置为主规范，以消除单个仪器或跨站点的仪器之间的可变性。这种独特的功能允许在任何Sony细胞分析仪上进行的实验产生高度可靠，准确和可重复的结果。此功能还消除了不同运营商或跨站点经验水平的协作或长期研究的设置主观性。

使用时，标准化模式将SA3800设置为预定的全局设置，消除了流式细胞仪中常见的仪器可变性。

光谱图书馆

Spectral Library允许用户创建个人试剂库，简化实验创建并节省时间。采集向导可帮助用户逐步获取和分析光谱库的单阳性控制。一旦获得，该试剂的光谱参考，包括光谱指数，可供将来使用。用户只需点击一下即可获得光谱库中的信息，从而提高精度并简化面板设计。

实验创作

可以在“创建实验”窗口中使用模板，现有实验，单染色或多色测定来创建实验。用户可以指向并单击以选择（或编辑）现有实验，并可在创建新实验时轻松选择孔或板的模板。设置分析向导可指导用户创建单染色或多色分析，从而简化实验创建。

习得功能与分析

所有采集功能（包括仪器设置）均在“采集”窗口中进行控制。工作表工具允许用户选择数据的显示方式（例如绘图类型），并根据他们的分析需求进行自定义。图和统计信息在采集期间提供实时信息。为了增加样品流向比色杯，可变增压器允许用户将采集速度设置为低（33μL/ min）正常或高（250μL/ min），从而提供灵活性。

走开事件检查器

为了实现离开操作，事件检查器监视流的完整性，以识别可能由堵塞产生的气泡或低事件率。确定问题后，可以将事件检查器首选项设置为清除堵塞并停止，或清除堵塞并继续下一个样本。管/井图显示哪个管或井有问题。

自发荧光探测器

在常规流式细胞术中，由吡啶（NAD / NADH），黄素（FMN，FAD）和其他细胞内氧化反应产生的细胞自发荧光可在例如FITC，PE和Pacific Blue TM通道中引起荧光信号污染。使用具有光谱技术的自发荧光探测器，可以轻松找到并减去自发荧光光谱指纹，以便研究人员能够看到真正的荧光种群。

光谱叠加

可以通过使用光谱覆盖功能来创建比较光谱曲线，以帮助在相同或不同实验中识别各个管/孔之间的独特群体。

系统关闭

关机时，SA3800软件会引导用户进行预关机清洁并自动关闭仪器。软件向导还可用于指导用户进行漂白清洁和冲洗程序。

De Novo Software的FCS Express

索尼的光谱分析仪包括De Novo Software的FCS Express。FCS Express提供一系列新的分析工具，从实时门控到批量分析。索尼光谱数据文件的原生支持可实现复杂的数据转换和可视化，如光谱叠加，tSNE，Spade和热图。

实时门控

可以使用实时门控设置点图和频谱图。实时门控允许用户快速，轻松地找到阳性和阴性群体，以增加对目标人群的保证。

板材和高含量分析

导入平板或高内容筛选数据并将其转换为热图，具有半径可视化的叠加和参数统计。

灵活分析

灵活的数据分析可以包括集成的电子表格，自定义计算，图表和回归分析。

扩展的数据可视化

软件直接读取光谱，FCS和CSV文件，以实现更深入的数据可视化。

批量和报告

批量分析使用户只需单击一下即可快速，轻松地处理任意数量的样品。为了支持演示，可以将数据直接导出到PowerPoint，PDF和Excel。

使用光谱分离，SA3800为荧光染料选择提供了最大的灵活性。结果与使用常规系统获得的结果相当。

使用3种激光对人类TBNK和成熟红细胞进行10色表型分析

在该图中，通过用CD45染色鉴定所有淋巴细胞。从CD45 +群体中鉴定出B细胞（CD19），NK细胞（CD56）和T细胞（CD3）。此外，使用CD235鉴定成熟的红细胞。进一步分析T细胞群以发现效应T细胞（CD8）和辅助T细胞（CD4）。使用HLA-DR和CD45RA分析这些T细胞群以发现亚群，NaïveCD4和CD8T细胞和活化的CD8T细胞。

固定的人全血用10种颜色染色，并在具有405nm，488nm和638nm激光的SA3800上进行分析。人群在前向（FCS）和侧向散射（SSC），然后CD45 +上进行门控。从该人群中，确定了几个子集。

图A显示来自人TBNK样品的CD45，CD3，CD4和CD8的光谱曲线的单阳性对照叠加。与TBNK样本（图B）相比，单个阳性对照覆盖匹配。CD4AlexaFluor®647和CD8AlexaFluor®532用于区分样品中T辅助细胞和T细胞毒性细胞的存在。

人淋巴细胞的比较数据

对固定的人淋巴细胞进行四色比较分析以评估分辨率和灵敏度。同一天在四个不同的仪器上使用相同的样品。在运行样品之前，每台仪器都具有推荐的清洁和仪器QC。与竞争对手相比，索尼SA3800和SP6800光谱分析仪结果显示负面和正面人群之间的分离更好。

此外，进行了自发荧光去除的比较。每种仪器都显示出来自阴性群体的自发荧光群体。SA3800能够识别群体，使用自发荧光探测器将其创建为自己的颜色，并减去群体以允许用户查看真实群体。

人淋巴细胞的4色比较数据

具有自发荧光去除的比较数据

使用具有405-nm和488-nm激光的10种颜色来寻找多个种群

在使用固定人血液的实验中，鉴定了B细胞（CD19），巨噬细胞（CD33），嗜碱性粒细胞（CD123），NK细胞（NKp46）和辅助T细胞（CD45 / CD3 / CD4）。此外，使用CD57分析较小的NKT细胞亚群。CD57主要表达阴性CD4细胞，因为它与CD8杀伤T细胞有关。

使用TBNK面板进行光谱指纹识别

细胞分析技术使用多种形式的对照来确定来自异质细胞混合物的细胞群。在该示例中，通过光谱指纹完全分析了6色TBNK面板。通过比较单个正光谱指纹，减少了用于识别群体的FMO控制的需要。另外，由于来自未染色细胞的自发荧光被视为单独的颜色，因此减去它以便能够容易地识别细胞谱系。

单阳性对照光谱图

仪器规格

3D AutoSampler

单装载机型号

*仅限405型号